订购/支持：theta_gene@163.com
公司网址：https://www.theta-gene.com
感受态细胞名称：DH5α Competent Cells；DH5α感受态细胞
菌种类型：E.coli
培养基： LB培养基。
产品规格：10×100μl
转化效率：1~5 × 109 cfu/µg pUC19
基因型：F- Φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17(rk-, mk+) phoA supE44 thi-1 gyrA96 relA1 λ-
抗性：无抗性
转化条件：42 ℃热激
培养条件：37 ℃, 有氧
用途：质粒克隆
储存条件：-80 ℃保存，干冰运输
特点和简介
n DH5α菌株是实验室最常用的感受态细胞，广泛用于基因克隆，质粒扩增等；
n 核酸内切酶(endA)缺陷，提高了质粒DNA的产量和质量；
n 重组酶(recA) 缺陷，减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA 的稳定性；
n lacZΔM15可用于菌落蓝、白斑筛选；
n 不适合克隆不稳定DNA。
简化转化步骤
1. 取DH5α感受态细胞置于冰浴融化。
2. 加入质粒DNA (1~100 ng），轻弹混匀，冰浴静置30分钟。
3. 42 ℃水浴热激90秒，快速转移至冰浴静置冷却3分钟。
4. 加入无抗培养基（SOC或LB），混匀后37 ℃，225rpm摇床振荡培养45分钟。
5. 取100μl培养物均匀涂布至对应抗性的琼脂培养板。37 ℃倒置培养12-16小时。
注意：如果必要可以离心（4000 rpm，3分钟）收集所有菌体，吹打悬浮后涂布平板。
注意事项
1. -80 ℃保存，避免反复冻融和放置时间过长。
2. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。进行转化操作时，应根据相应的温度及无菌条件的要求进行。转化物的体积不能超过感受态细胞体积的1/10。
3. 混入质粒时应轻柔操作。
-
His标签重组蛋白表达与纯化试剂盒说明书334.68 KB
