Helicase-Dependent Amplification Kit

-20℃储存，干冰运输。

包装内容：

产品简介：

依赖于热稳定的DNA解旋酶以及常温链置换聚合酶Bst，无需热循环实现核酸等温扩增；组合逆转录酶可实现RNA扩增；

极高的灵敏度，可检出单拷贝DNA模板；

基于此反应的应用包括reverse transcription HDA (RT-HDA), real-time quantitative HDA (qHDA), real-time quantitative RT-HDA (qRT-HDA)。

使用说明：

于冰上设置HDA反应体系如下：

吹吸均匀后短暂离心收集于管底，于65ºC孵育90分钟。

常见问题及建议

1.      需严格遵循PCR操作规程以避免模板污染。

2.      反应优化参数：

（1）    MgSO₄终浓度范围为3-4.5mM；

（2）    NaCl终浓度范围为20-50mM；

（3）    引物浓度范围为50-200nM；

3.      引物设计原则：

（1）    扩增产物长度80-120bp，68℃，GC含量约40%；

（2）    引物长度介于24-33nt，60℃，35%含量<60%；

（3）    避免重复序列，发卡环结构和引物二聚体。

4.      可配合合适反转录酶/RNA核酸酶抑制剂进行RNA模板扩增反应。