Golden Gate组装试剂盒(BsmBI)

-20℃储存，低温运输。

包装内容：

产品简介：

单一反应包含两种酶活：IIS型限制性内切酶酶切和连接酶，实现无缝克隆-组装后无额外碱基存在

单次反应即可按顺序组装多个片段（2 - 50多个）

亦可用于单片段克隆和文库制备

有效组装高GC区和重复区

兼容片段长度广（<100 bp to >15 kb）

使用说明：

1.        插入片段

预克隆策略适用于<250 bp或>3 kb的插入片段，或者那些在PCR扩增过程中可能累积错误、含有重复元件的插入片段。

扩增子插入片段通过在上下游的PCR引物中引入侧翼碱基和BsmBI限制性内切酶识别位点；插入片段：载体骨架摩尔比建议2:1。

对于单插入片段扩增子可直接使用PCR产物，但最好纯化柱进行纯化。多插入片段必须进行纯化。

2.        设置组装反应

解冻并彻底混匀各组分，设置如下反应体系。

预克隆插入片段必须在插入片段序列的两端具有正确方向的BsmBI限制酶位点。

扩增子插入片段必须在扩增子的两端具有侧翼碱基（推荐6个）和BsmBI限制酶位点，且方向正确。

对于≤10个插入片段的组装，使用1 µl酶；对于>10个插入片段的组装，使用2 µl酶。

如果DNA组分体积需要，可将反应体积放大到25µl。