SpCas9 H840A Nickase

-20℃储存，低温运输。

包装内容：

产品简介：

种属来源：同样基于野生型SpCas9的基因工程改造变体。

基因工程：通过将SpCas9蛋白第840位的组氨酸（H）突变为丙氨酸（A）而获得。这个突变位于HNH结构域的催化核心，使其失活。

蛋白特性：H840A突变使HNH结构域完全失活，但RuvC结构域功能完好。因此，该蛋白只能切割与sgRNA非互补配对的DNA链（NTS链），形成单链断裂（缺刻），而不能切割互补链。

酶活性质：SpCas9 H840A Nickase只能切割NTS链，在PAM上游第3个碱基的位置产生单链缺刻，形成3'突出。与D10A类似，这种单链断裂也由高保真修复途径修复，编辑效率较低但特异性高。

应用：主要与SpCas9 D10A Nickase配对使用，实现双切口酶策略。通过使用一对相邻的sgRNA，分别引导D10A和H840A在两条互补链上产生邻近缺刻，形成具有5'突出端的"类DSB"。这种"异源二聚体"策略能完全避免单个切口酶自身二聚化产生DSB的风险，是保真度最高的双切口酶配置方案。