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全球最大CRISPR工具平台(蛋白/mRNA)
The World's Largest Precision Gene/Base/Prime Editing Arsenal
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产品编号 | 产品名称 | 包装 |
N1086 | SpeCas9 mRNA (1mg/ml) | 100/1000μg |
名称/别名: SpeCas9(petrasii葡萄球菌来源的Cas9核酸酶)
来源种属: Staphylococcus petrasii
CRISPR类型: II型CRISPR系统(属II-A亚型)
肽链长度: 1,058个氨基酸(aa)
活性:识别简单NNGG PAM序列(通过GFP报告系统与深度测序验证,偏好NNGG);具有核酸内切酶活性,可在哺乳动物细胞中诱导靶位点双链断裂(DSB);编辑效率依赖靶序列(在HEK293T细胞中效率为5%-40%)
特性:高编辑活性: 在13个内源位点测试中与SaCas9效率相当;脱靶效应: 对PAM近端错配敏感(位置18-20),但整体脱靶率低于Sha2Cas9;可工程化改造:高保真变体SpeCas9-HF(R247A/N415A/S421A突变)显著降低脱靶率;GUIDE-seq验证:脱靶位点从4个降至2个,脱靶读数减少>100倍
应用:基因组编辑: 适用于HEK293T等哺乳动物细胞的靶向基因敲除;潜在碱基编辑载体: 可通过融合脱氨酶开发新型碱基编辑器(类比SauriCas9);高保真基因治疗工具: SpeCas9-HF提供高特异性编辑选项
CDS (3432nt):
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Wang, S. et al. Identification of SaCas9 orthologs containing a conserved serine residue that determines simple NNGG PAM recognition. PLoS Biol. 20, e3001897 (2022).
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