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Cas12f1Super mRNA

Cas12f1Super mRNA

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包装内容:

产品编号

产品名称

包装

N1271

Cas12f1Super mRNA (1mg/ml)

100/1000μg

 

产品简介:

Cas12f1Super

Un1Cas12f1 (工程化版本 CasMINI), 紧凑型 (528 aa)

Cas12f1Super进化起点是 CasMINICasMINI本身是Un1Cas12f1经过理性设计和工程化改造的版本(包含V3.13突变和ge4.1向导支架),已具备一定的哺乳动物细胞活性。

包含了以下5个关键氨基酸替换突变:K52E(REC结构域); K129E; E206K(WED结构域); K227E; K506E(PIWI结构域)

同源定向修复(HDR)效率:在报告系统中最高提升达11倍。在内源性位点上,于HEK293T细胞中测试的所有7个位点均显示出显著更高的HDR效率,提升幅度最高达4.0倍,绝对效率在NLRC4位点达到30%

非同源末端连接(NHEJ)效率:在所有靶位点也有提升,但增幅通常低于HDR

特异性:通过DISCOVER-Seq技术评估,其脱靶效应与亲本CasMINI相当,未因活性提高而增加新的脱靶位点,保持了高保真性。

应用拓展——碱基编辑:当其催化失活版本(dCas12f1Super)用于构建腺嘌呤碱基编辑器(ABE)时,相比dCasMINI-ABE,在多个位点显示出最高10倍的效率提升,绝对编辑效率可达17%,且产物纯净。

 

参考文献

Gorbenko, F. et al. Directed evolution of compact RNA-guided nucleases for homology–directed repair in mammalian cells. Preprint at https://doi.org/10.1101/2025.10.27.684765 (2025).


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