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superDn29蛋白

superDn29蛋白

superDn29 是基于Dn29大丝氨酸重组酶进行工程化改造而来。

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superDn29 是基于Dn29大丝氨酸重组酶进行工程化改造而来。

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包装内容:

产品编号

产品名称

包装

P6320

superDn29蛋白

1000/2500pmol

 

产品简介:

superDn29 是基于Dn29大丝氨酸重组酶进行工程化改造而来。

高效性,最大化在人类基因组内源性位点(如attH1)的DNA整合效率。

Coiled-Coil 铰链区(残基373-393449)存在一个效率突变热点,包括L388P, Q390P等,这些脯氨酸突变可能通过破坏螺旋二级结构来增强活性。另一个关键突变 D503N位于一个三天门冬氨酸片段中,通过减少负电荷可能增强了与DNA磷酸骨架的相互作用。

superDn29催化位点特异性DNA重组反应。它识别并切割供体DNA上的 attP位点和基因组DNA上的 attB(或相似的伪位点 attH)位点,通过丝氨酸介导的切割和链交换机制,将位于两个位点之间的DNA序列无缝整合到基因组中。

superDn29的整合效率达到野生型Dn29 10倍。

特异性(attH1整合事件与主要脱靶位点attH3整合事件的比率)提升了 70倍。

superDn29dCas9融合(形成 superDn29-dCas9),并通过sgRNA被招募到目标基因组位点时,其效率得到极大增强。

在结合了优化供体DNAe-attP)后,superDn29-dCas9attH1位点的整合效率可高达 ~53%,相比野生型Dn29实现了 12.3倍的提升。

 

参考文献

Fanton, A. et al. Site-specific DNA insertion into the human genome with engineered recombinases. Nat. Biotechnol. https://doi.org/10.1038/s41587-025-02895-3 (2025) doi:10.1038/s41587-025-02895-3.