CpAgo蛋白

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包装内容：

产品简介：

全称：Clostridium perfringensArgonaute (产气荚膜梭菌Argonaute蛋白)

类型：原核Argonaute蛋白 (pAgo)

来源：Clostridium perfringens(产气荚膜梭菌)，一种中温细菌。

核心特征：一种在37°C下具有高效催化活性的核酸酶，兼具不依赖引导链和DNA引导的双重催化功能。

催化活性

CpAgo展现出卓越且多样的催化活性：

不依赖引导链的活性 (Guide-independent activity):

底物：能高效降解质粒DNA和结构化的RNA(如SL5 RNA)。

产物：将大分子核酸降解成约21个核苷酸的小片段。这些DNA片段被认为是后续靶向切割的潜在引导链来源。

催化中心：该活性不依赖于PIWI结构域的经典催化位点，而是由PAZ结构域中的D8和D249残基驱动。

金属离子依赖性：活性最大化需要Mn²⁺，而Zn²⁺会强烈抑制其活性。

DNA引导的靶向切割活性 (DNA-guided cleavage activity):

引导链：单链DNA (ssDNA)。

靶标：可切割单链DNA (ssDNA) 和双链DNA (dsDNA)。

切割dsDNA的条件：需要靶标dsDNA区域存在部分解链（如“气泡”结构），因为CpAgo本身不具备解旋酶活性。

生物学功能

在大肠杆菌中的功能实验证实了CpAgo的生物学作用：

·       引导链非依赖的质粒清除：表达CpAgo能有效降解细胞内的外来质粒，而PAZ口袋突变体（D80A, D249A）此功能减弱。

·       DNA引导的DNA干扰：在提供外源引导DNA的情况下，CpAgo能在细胞内特异性切割目标质粒，发挥防御作用。

参考文献

Liu, Y. et al. The PAZ pocket and dimerization drive CpAgo’s guide-independent and DNA-guided dual catalysis. Nat. Commun. 16, 6599 (2025).