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包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P6322 | vPE蛋白 | 1000/2500pmol |
产品简介:
基于Streptococcus pyogenes Cas9(H840A) 切口酶骨架,以PEmax(Cas9n-H840A-R221K-N394K-MMLV-RT)为起点,先回退 R221K/N394K 得到“PE”基底。引入 4 个突变(R221K-K848A-H982A-N1317R)以松弛切口定位并促进 5′-端降解,得到 xPE。将xPE的Cas9n组件移植到含La蛋白的PE7架构(pegRNA稳定化),最终生成very-precise prime editor(vPE)。
全长大约255 kDa。
结构特征
-采用 Cas9n(H840A) 的 R-loop 松弛突变。
-非靶链 5′-端在切口后更易解离并被降解,从而减少对编辑链的竞争。
-与La蛋白融合的PE7架构进一步稳定pegRNA 3′-端,提高编辑效率。
酶学特性
-切口松弛,插入/缺失(indel)错误率最高降低60倍(vs PEmax)。
-pegRNA-only模式:平均效率32 %,indel 0.14 %。
-pegRNA+ngRNA模式:平均效率31 %,indel 1.9 %。
-对点突变、小片段插入/删除(1–115 bp)及 larger substitution均保持高保真,且off-target 编辑降低至多14倍。
- 在人多种细胞系及小鼠ESC中均验证低错误率(<0.3 % indel)。
氨基酸序列:Addgene #225258
参考文献
Chauhan, V. P., Sharp, P. A. & Langer, R. Engineered prime editors with minimal genomic errors. Nature (2025). https://doi.org/10.1038/s41586-025-09537-z