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GeoCas9蛋白

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*若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。

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包装内容:

产品编号

产品名称

包装

P6074

GeoCas9蛋白

1000/2500pmol

 

产品简介:

来源于嗜热细菌GeobacillusstearothermophilusGeoCas9),属于II-CCRISPR-Cas9核酸酶。

分子量:约1,087个氨基酸,比SpyCas91,368aa)更小,结构紧凑,适合递送。

温度适应性:最适活性温度:5070°CSpyCas9仅至45°C)。

热稳定性:变性温度比SpyCas920°C,支持高温体外反应或嗜热菌基因编辑。

PAM序列:天然PAM5'-NNNNCRAA-3'R=AG)。

工程化变体:通过替换PAM互作域(PIdomain),可识别5'-NNNNGMAA-3',靶点范围翻倍。

sgRNA设计:

tracrRNA长度:≥91nt(过短显著降低活性)。

spacer长度:2122nt最优(SpyCas920nt)。

嵌合sgRNA结构:crRNA-tracrRNA通过GAAA四环连接。

 体内外性能:

哺乳动物细胞编辑:RNP递送后,在HEK293T中编辑效率与SpyCas9相当。

血浆稳定性:在人血浆中37°C孵育8小时后仍保留活性,半衰期显著优于SpyCas9(后者1.5小时内失活)。

无末端修剪活性:切割后产生平末端,提升编辑可预测性。

 独特优势:

高温与体内双兼容:唯一同时支持嗜热菌编辑和哺乳动物RNP递送的Cas9

递送友好:体积小+血浆稳定性高,适合AAV或脂质体递送。

天然多样性利用:无需蛋白工程即可获得高稳定性,优于人工定向进化。

 GeoCas9填补了高温CRISPR应用的空白,兼具热稳定性、紧凑结构和体内长效性,是嗜热生物工程与体内基因治疗的理想工具。

 

参考文献

Harrington, L. B. et al. A thermostable Cas9 with increased lifetime in human plasma. Nat. Commun. 8, 1424 (2017).