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包装内容:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P6153 | BrCas12b蛋白 | 1000/2500pmol |
产品简介:
名称/别名:Brevibacillus sp. SYP-B805 Cas12b(BrCas12b)
CRISPR类型:Type V-B(Cas12b亚型)
活性:
高耐热性:在高达70°C条件下保持dsDNA切割活性。
PAM依赖性:识别TTN PAM序列(偏好TTTN)。
双切割模式:兼具靶向切割(cis-cleavage)和非特异性反式切割(trans-cleavage)活性。
高效酶动力学:反式切割催化效率达1.74×10⁷ M⁻¹s⁻¹(62°C)。
特性:
超强热稳定性:熔解温度(Tₘ)为67.3°C,远高于同类蛋白(如AacCas12b Tₘ=55.3°C)。
缓冲液兼容性:在RT-LAMP等温扩增缓冲液中稳定工作,无需添加剂。
单管反应适配性:可与RT-LAMP耦合,实现“样本入-结果出”的一步法检测。
工程化优势:经改造后适用于冻干试剂,常温储存保持活性。
应用:
SARS-CoV-2变异株鉴别:通过设计特异性sgRNA和引物,区分Alpha、Beta、Gamma、Delta、Omicron等VOCs。
便携式诊断平台:集成于CRISPR-SPADE检测体系,10–30分钟内完成临床样本检测(灵敏度92.8%,特异性99.4%)。
多场景部署:开发冻干试剂盒(无需冷链)及手机成像/便携设备(FISSH),支持居家及偏远地区使用。
双信号监测:同步追踪RT-LAMP扩增(FITC通道)和Cas12b切割(HEX通道),提升检测可靠性。
参考文献
L. T. Nguyen et al. A thermostable Cas12b from Brevibacillus leverages one-pot discrimination of SARS-CoV-2 variants of concern. eBioMedicine 2022, 77, 103926.