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全球最大CRISPR工具平台(蛋白/mRNA)
The World's Largest Precision Gene/Base/Prime Editing Arsenal
高保真链置换聚合酶 *若您需要这支酶的表达载体和菌株,可以联系我们。
-20℃储存,<0℃运输。
产品编号
产品名称
包装
P2007
Bst HF DNA Polymerase (8U/μl)
2000U
K1002
dNTP (10mM each)
1ml
K1004
MgSO4 (100mM each)
0.5ml
B2007
10X Bst HF Reaction Buffer
大片段基因工程蛋白,具有5'→3' DNA聚合酶活性,不具有3'→5'和5'→3'的核酸外切酶活性。具有很强的链置换(strand displacement)能力。
适用于环介导的等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP),链置换DNA合成以及微量DNA/高GC区域DNA测序反应。
具备更快的扩增速度,产量,耐盐性和热稳定性。
在65℃、30分钟内催化完成25nmole dNTP掺入到酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位。
无外源核酸酶活性。
LAMP等温扩增反应体系
Component
25μl reaction
Final Concentration
2.5µl
1X (contains 2mM MgSO4)
MgSO4 (100mM)
1.5µl
6mM (8mM total)
dNTP Mix (10mM)
3.5µl
1.4mM each
FIP/BIP Primers (25X)
1µl
1.6µM
F3/B3 Primers (25X)
0.2µM
Loop F/B Primers (25X)
0.4µM
8U
DNA Sample
variable
> 10 copies or more
Nuclease-free Water
to 25µl
轻轻混匀后短暂离心,65ºC孵育30-60分钟。
引物设计参考http://primerexplorer.jp/lampv5e/index.html或者https://lamp.neb.com/#!/
Loop引物不是LAMP反应必需的,但是使用Loop引物可以缩短约1/3扩增时间。
建议设置无模板对照反应以确保扩增的特异性。
优化反应可调整Mg2+浓度(4-10mM),酶量(1-8U)或反应温度(50-68ºC)。
严格遵守PCR实验室操作规程,避免发生污染。