Bsu DNA Polymerase I, Large Fragment

链置换聚合酶

*若您需要这支酶的表达载体和菌株，可以联系我们。

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货号：

P2008

包装：

500U

2500U

链置换聚合酶

*若您需要这支酶的表达载体和菌株，可以联系我们。

-20℃储存，<0℃运输。

包装内容：

产品编号	产品名称	包装
P2008	Bsu DNA Polymerase I, Large Fragment (5U/μl)	500U
K1001	dNTP (2.5mM each)	150μl
B2008	10X Bsu Reaction Buffer	250μl
B1002	5X Annealing Buffer for DNA Oligo	1ml

产品简介：

来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis, Bsu) DNA聚合酶大片段，具有5'→3' DNA聚合酶活性，不具有3'→5'和5'→3'的核酸外切酶活性。具有链置换(strand displacement)活性，常用于重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)反应，其扩增(isothermal amplification)温度通常为37℃。

用于链置换DNA合成，随机引物标记，cDNA第二链合成，DNA单个dA加尾反应。

由于缺乏3'→5'核酸外切酶活性，Bsu DNA Polymerase, Large Fragment不能切除3'未配对的突出末端，因而不适用于产生平末端。

在37℃、30分钟内催化完成10nmole dNTP掺入到酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位。

无外源核酸酶活性。

使用说明：

DNA模板延伸反应体系

Component	Volume	Final Concentration
DNA Template	xµl	10µM
Primer (20µM)	25µl	10µM
5X Annealing Buffer for DNA Oligo	10µl	1X
Nuclease-free Water	Up to 50µl
90ºC孵育1分钟，然后梯度降温（1℃/分钟）至25ºC退火形成Primer/Template杂交双链。
Annealed Primer/template (10µM)	1µl	0.5µM
10X Bsu Reaction Buffer	2µl	1X
dNTP Mix (2.5mM each)	1µl	125µM each
Bsu DNA Polymerase I, Large Fragment (5U/μl)	1µl	5U
Nuclease-free Water	15µl
Total Volume	20µl

轻轻混匀后短暂离心，37ºC行孵育适当时间，延伸速率约1kb/min。75ºC孵育20min以终止反应。