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T4 Polynucleotide Kinase

T4 Polynucleotide Kinase

T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)可催化ATPγ-磷酸基团转移至DNA/RNA5´-羟基末端,兼具磷酸酶活性,适用于末端标记、探针制备、磷酸化连接及去磷酸化。

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T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)可催化ATPγ-磷酸基团转移至DNA/RNA5´-羟基末端,兼具磷酸酶活性,适用于末端标记、探针制备、磷酸化连接及去磷酸化。

T4 Polynucleotide Kinase

 

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包装内容

产品编号

产品名称

包装

P2061

T4 Polynucleotide Kinase (10 U/μl)

1000/5000U

B2061

10X T4PNK Reaction Buffer

1ml

产品简介

T4多聚核苷酸激酶能够催化ATPγ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNARNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。T4多聚核苷酸激酶还具有磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从寡核苷酸的磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。

可用于DNARNA的末端标记,用作探针和进行DNA测序;在寡核苷酸上添加5´磷酸,以便进行后续连接;除去3´磷酸基团。

来源于大肠杆菌菌株,携带有T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)基因

活性定义:37℃30分钟内,将转移ATP1 nmol γ-磷酸基团转移到DNA 5'-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。

使用说明

提高ATP的浓度可让缺口磷酸化。切刻位点不能有效地磷酸化。CTPGTPTTPUTPdATPdTTP均可以替代ATP作为磷酸供体。

利用交换反应可以避免末端标记前的去磷酸化,尽管这会导致较低的标记比活性。

在反应体系中添加终浓度为100 µM ADP便仍可保持足够的掺入水平。要达到更高的掺入水平,请使用Sambrook, J. et al所描述的缓冲液。