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全球最大CRISPR工具平台(蛋白/mRNA)
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T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)可催化ATP的γ-磷酸基团转移至DNA/RNA的5´-羟基末端,兼具3´磷酸酶活性,适用于末端标记、探针制备、5´磷酸化连接及3´去磷酸化。
-20℃储存,0℃运输。
产品编号
产品名称
包装
P2061
T4 Polynucleotide Kinase (10 U/μl)
1000/5000U
B2061
10X T4PNK Reaction Buffer
1ml
T4多聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。T4多聚核苷酸激酶还具有3´磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。
可用于DNA或RNA的末端标记,用作探针和进行DNA测序;在寡核苷酸上添加5´磷酸,以便进行后续连接;除去3´磷酸基团。
来源于大肠杆菌菌株,携带有T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)基因
活性定义:37℃,30分钟内,将转移ATP上1 nmol γ-磷酸基团转移到DNA 5'-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。
提高ATP的浓度可让缺口磷酸化。切刻位点不能有效地磷酸化。CTP、GTP、TTP、UTP、dATP及dTTP均可以替代ATP作为磷酸供体。
利用交换反应可以避免末端标记前的去磷酸化,尽管这会导致较低的标记比活性。
在反应体系中添加终浓度为100 µM ADP便仍可保持足够的掺入水平。要达到更高的掺入水平,请使用Sambrook, J. et al所描述的缓冲液。