T3 DNA Ligase

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包装内容

产品简介

T3 DNA连接酶来源于T3噬菌体，是一种ATP依赖型双链DNA连接酶。该酶可催化双链DNA相邻的5´-磷酸基团和3´-羟基基团之间形成磷酸二酯键。T3 DNA连接酶可以高效催化粘性末端、平末端和切刻位点连接。与T4 DNA连接酶一样，在反应中加入PEG 6000 可以提高平末端连接效率。与T4 DNA连接酶相比，T3 DNA连接酶在反应中对NaCl的耐受性更高（2 倍），因而成为需要DNA连接酶活性的体外分子生物学方案的通用选择。

可用于克隆限制性内切酶消化生成的DNA片段；克隆PCR产物；将连接子或接头与双链DNA相连；线性DNA环化；双链DNA切刻位点连接；定点突变。

来源于大肠杆菌，含有编码T3 DNA连接酶的重组基因。

1单位是指在20 μl总反应体系，1X T3 DNA连接酶反应缓冲液中，25℃条件下1分钟能使50%的经HindIII消化的100 ng λ连接所需的酶量。

使用说明

ATP是反应中必不可少的辅因子。这与需要NAD作为辅因子的E. coli DNA连接酶不同。

如果稀释酶需要在-20℃条件下长期储存，应使用含有50%甘油的贮存缓冲液稀释。

65℃加热10分钟，可使T3 DNA连接酶失活。不过，反应需要在不含PEG的缓冲液中进行。