Klenow片段 (3´→5´ exo-)

Klenow片段（3´→5´ exo-）是DNA聚合酶I的N末端截短突变体（D355A、E357A），保留了聚合酶活性与中等链置换活性，但彻底缺失5´→3´和3´→5´双向外切酶活性，适用于随机引物探针制备和Sanger测序。

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Klenow片段（3´→5´ exo-）是DNA聚合酶I的N末端截短突变体（D355A、E357A），保留了聚合酶活性与中等链置换活性，但彻底缺失5´→3´和3´→5´双向外切酶活性，适用于随机引物探针制备和Sanger测序。

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包装内容

产品编号	产品名称	包装
P5011	Klenow片段 (3´→5´ exo-)	1000/5000 U

Klenow片段（3´→5´ exo-）是DNA聚合酶I的N末端截短物，它保留了DNA聚合酶活性，但缺失了5´→3´核酸外切酶活性。该酶经突变（D355A、E357A）去除了其3´→5´核酸外切酶活性。

可用于随机引物制备探针；双脱氧法DNA测序；随机引物法标记；中等链置换活性，

不适用于产生平末端。

来源于大肠杆菌菌株，包含E. coli polA（D355A、E357A）基因的片段，片段起始位置在密码子324处。

1单位是指在37℃条件下，30分钟能使10 nmol的dNTP掺入酸不溶物所需的酶量。

75ºC孵育20分钟可使Klenow片段 (3´→5´ exo-)失活。

Klenow片段（3´→5´ exo-）因去除了3´→5´核酸外切酶的活性不能去除3´突出端，故不适用于生成平末端的反应。

用于双脱氧法DNA测序（如Sanger测序）时，推荐每5 µl反应体系中加入1单位的Klenow片段（3´→5´ exo-）。

加入dNTP，Klenow片段（3´→5´ exo-）在常见缓冲液中均有活性。