Antarctic Phosphatase (热敏）

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包装内容

产品简介

源自南极微生物的、热敏感的重组表达纯化的磷酸酶，可以催化去除DNA、RNA、dNTP、rNTP 5'或3’末端磷酸基团。DNA或RNA 5’端脱去磷酸基团(简称脱磷或去磷)后就不能被连接酶(ligase)所连接，常用于避免载体的自连、提高基因克隆时的阳性率、选择性连接特定序列等。

也可以脱去蛋白质丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上的磷酸基团。

快速去磷酸化，只需37ºC孵育15分钟即可；快速失活，75ºC孵育5分钟即可完全失活；使用方便，在各种内切酶和PCR缓冲液中保持不低于100%的活性，可以和质粒DNA的酶切等同时进行；兼容性强，对于5'或3'突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤；适用于后续的连接反应，经Antarctic Phosphatase脱磷酸基团，并75ºC孵育5分钟失活后，通过柱纯化或凝胶电泳后切胶回收纯化等适当处理后，可用于后续的连接反应。

通过去除载体或DNA片段5'末端的磷酸基团，防止载体或DNA片段自连；质粒DNA同时进行内切酶消化和脱磷；通过5'末端脱磷，制备用于T4 PNK进行5'末端标记的DNA或RNA；去除DNA、RNA、rNTP和dNTP的5'末端的磷酸基团；PCR产物中去除dNTP和焦磷酸根；用于蛋白质丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。

来自于大肠杆菌菌株，Antarctic Phosphatase通常会形成同源二聚体，其单体的分子量为35kD。

70°C孵育5分钟可热失活。

使用说明

酶活性需要有Zn2+和Mg2+的存在。

在EDTA等金属离子螯合剂、无机磷酸盐及磷酸盐类似物存在时，其活性被抑制。