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R2-Tgopt(R2-TG optimized)是来源于斑胸草雀(Taeniopygia guttata)的R2逆转座子蛋白的工程化优化变体。在R2-Tg野生型序列基础上,通过引入结构指导的氨基酸替换和核酸结合能力增强突变,经密码子优化并在农杆菌中引入马铃薯转化酶内含子IV以抑制渗漏表达,R2-Tgopt显著提升了逆转录酶活性、供体RNA结合效率和TPRT催化能力。在本氏烟草中,R2-Tgopt表现出最高的编辑活性,在dTRBO-GFP报告系统中恢复GFP荧光(~16个荧光灶/叶),介导长达2.2 kb的GFP表达盒整合及重组酶着陆垫(0.6 kb)的单步安装。R2-Tgopt是当前R2系统中植物编辑活性最高的变体,也是在水稻(Oryza sativa)愈伤组织中实现高达17%靶向基因整合的核心酶。
R2-Tgopt(R2-TG optimized)是来源于斑胸草雀(Taeniopygia guttata)的R2逆转座子蛋白的工程化优化变体。在R2-Tg野生型序列基础上,通过引入结构指导的氨基酸替换和核酸结合能力增强突变,经密码子优化并在农杆菌中引入马铃薯转化酶内含子IV以抑制渗漏表达,R2-Tgopt显著提升了逆转录酶活性、供体RNA结合效率和TPRT催化能力。在本氏烟草中,R2-Tgopt表现出最高的编辑活性,在dTRBO-GFP报告系统中恢复GFP荧光(~16个荧光灶/叶),介导长达2.2 kb的GFP表达盒整合及重组酶着陆垫(0.6 kb)的单步安装。R2-Tgopt是当前R2系统中植物编辑活性最高的变体,也是在水稻(Oryza sativa)愈伤组织中实现高达17%靶向基因整合的核心酶。
R2-Tgopt(R2-TG optimized)是来源于斑胸草雀(Taeniopygia guttata)的R2逆转座子蛋白的工程化优化变体。在R2-Tg野生型序列基础上,通过引入结构指导的氨基酸替换和核酸结合能力增强突变,经密码子优化并在农杆菌中引入马铃薯转化酶内含子IV以抑制渗漏表达,R2-Tgopt显著提升了逆转录酶活性、供体RNA结合效率和TPRT催化能力。在本氏烟草中,R2-Tgopt表现出最高的编辑活性,在dTRBO-GFP报告系统中恢复GFP荧光(~16个荧光灶/叶),介导长达2.2 kb的GFP表达盒整合及重组酶着陆垫(0.6 kb)的单步安装。R2-Tgopt是当前R2系统中植物编辑活性最高的变体,也是在水稻(Oryza sativa)愈伤组织中实现高达17%靶向基因整合的核心酶。
• 来源:来源于斑胸草雀(Taeniopygia guttata)R2逆转座子的工程化优化变体
• 工程化改造:在R2-Tg基础上引入结构指导的氨基酸替换,增强DNA结合能力和RT活性
• 蛋白结构域:ZF(DNA结合)、RT(逆转录酶)、RLE(核酸内切酶),功能域完整
• 作用机制:通过靶向引物逆转录(TPRT)实现RNA模板引导的DNA整合,不依赖DSB
• 靶位点特异性:识别28S rDNA保守序列,本氏烟草和水稻中均保持高靶特异性
• 高植物活性:本氏烟草中为所有R2变体中活性最高;在水稻愈伤组织中实现>12%–17%的整合效率
• 供体RNA兼容性:兼容多种供体RNA架构(标准UTR和带同源臂的mDR模板)
• 植物表达优化:含马铃薯转化酶内含子IV抑制农杆菌渗漏表达;含NLS核定位信号
• 应用广度:支持T-DNA质粒共递送、RNA病毒介导瞬时供体递送等多种模式
产品编号 | P6417 |
名称/别名 | R2-Tgopt / R2-TG optimized / 优化型斑胸草雀R2 |
蛋白类型 | 非LTR逆转座子编码蛋白(R2家族) |
物种来源 | 斑胸草雀(Taeniopygia guttata) |
关键结构域 | ZF(锌指DNA结合)、RT(逆转录酶)、RLE(核酸内切酶) |
功能机制 | 靶向引物逆转录(TPRT) |
靶向位点 | 28S rDNA保守序列 |
编辑活性(本氏烟草) | dTRBO-GFP:~16 GFP foci/叶;本氏烟草多个靶点高效整合 |
储存条件 | -20℃储存,低温运输 |
包装规格 | 1000 pmol / 2500 pmol |
• 高要求植物基因敲入:作为R2系统中植物编辑活性最高的变体,适用于对整合效率要求较高的基因添加实验
• 单子叶作物基因工程:在水稻中已验证的靶向基因整合,适用于水稻及其他单子叶作物的安全港基因敲入
• 重组酶着陆垫高效安装:用于单步安装attP/lox66/FRT等多重组酶识别位点,实现多基因模块化堆叠
• 无DNA中间体整合:结合RNA病毒介导的供体RNA递送,实现不依赖DNA供体的可调控基因整合
• 合成生物学通路装配:适用于多基因代谢通路在植物rDNA安全港中的有序装配与表达
Ali, Z., Butt, H., Alghamdi, R., Ramirez, J. L. M., & Mahfouz, M. (2026). Efficient site-specific gene addition using R2 retrotransposons in tobacco and rice. Nature Biotechnology. https://doi.org/10.1038/s41587-026-03181-6