产品简介
R2-Tg是一种来源于斑胸草雀（Taeniopygia guttata）基因组的非长末端重复（non-LTR）逆转座子编码蛋白，属于R2家族。该蛋白具有独特的DNA结合结构域（ZF）、逆转录酶结构域（RT）和限制酶样核酸内切酶结构域（RLE），能够识别并特异性切割28S核糖体DNA（rDNA）中的保守靶位点，通过靶向引物逆转录（TPRT）机制实现RNA模板引导的DNA序列整合。在植物中，R2-Tg经密码子优化和核定位信号（NLS）修饰后，可在本氏烟草（Nicotiana benthamiana）中介导GFP表达盒（2.2 kb）和重组酶着陆垫（0.6 kb）等大片段DNA的位点特异性整合，在rDNA靶点的插入效率达53%–75%（基于5'端完整性分析）。R2-Tg为本氏烟草中R2介导基因添加系统的功能性基准变体，同时也是后续优化变体R2-Tgopt的野生型母体。
产品特性
• 来源：来源于斑胸草雀（Taeniopygia guttata， zebra finch）基因组的R2逆转座子
• 蛋白结构域：包含N端锌指DNA结合结构域（ZF）、中央逆转录酶结构域（RT）和C端限制酶样核酸内切酶结构域（RLE）
• 作用机制：通过靶向引物逆转录（TPRT）实现RNA模板引导的DNA整合，不依赖于DNA双链断裂（DSB）或宿主DNA修复通路
• 靶位点：特异性识别并切割28S核糖体DNA（rDNA）中的保守序列，实现位点特异性插入
• 植物兼容性：经密码子优化和NLS融合后，可在本氏烟草中稳定表达并定位于细胞核
• 编辑活性：在本氏烟草dTRBO-GFP报告系统中可恢复GFP荧光（～24个荧光灶/叶），介导全长GFP基因盒整合（～75%完整性）和重组酶着陆垫安装（～53%完整性）
• 表达优化：原始ORF在农杆菌中渗漏表达抑制转化，需引入马铃薯转化酶内含子IV（intron IV）抑制渗漏表达
• 递送方式：支持T-DNA质粒共递送及RNA病毒介导的瞬时供体RNA递送
产品参数
产品编号 | P6416 |
名称/别名 | R2-Tg / R2 from Taeniopygia guttata / wild-type R2-TG |
蛋白类型 | 非LTR逆转座子编码蛋白（R2家族） |
物种来源 | 斑胸草雀（Taeniopygia guttata） |
关键结构域 | ZF（锌指DNA结合）、RT（逆转录酶）、RLE（核酸内切酶） |
功能机制 | 靶向引物逆转录（TPRT） |
靶向位点 | 28S rDNA保守序列 |
编辑活性（本氏烟草） | dTRBO-GFP报告系统：～24 GFP foci/叶；全长GFP整合：～75% 5'端完整性 |
储存条件 | -20℃储存，低温运输 |
包装规格 | 1000 pmol / 2500 pmol |
应用场景
• 植物安全港基因敲入：用于将2-3 kb功能基因表达盒精确整合到植物rDNA安全港位点
• 重组酶着陆垫安装：用于单步安装attP（Bxb1）、lox66（Cre）和FRT（Flp）等多个正交重组酶识别位点
• 多基因堆叠（gene stacking） ：结合Bxb1/Cre/Flp重组酶系统实现多基因的模块化整合
• RNA病毒介导的瞬时可调控整合：通过TRV/TSWV病毒递送供体RNA模板，实现无DNA中间体的R2整合
• 作物基因工程：在烟草等双子叶植物中建立R2介导的基因添加系统，并为水稻等单子叶植物应用奠定基础
文献参考
Ali, Z., Butt, H., Alghamdi, R., Ramirez, J. L. M., & Mahfouz, M. (2026). Efficient site-specific gene addition using R2 retrotransposons in tobacco and rice. Nature Biotechnology. https://doi.org/10.1038/s41587-026-03181-6
