Strand Displacement Amplification Kit

DNA切刻酶/聚合酶介导的核酸等温扩增

*若您需要这支酶的表达载体和菌株，可以联系我们。

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1280.00

货号：

P4004

包装：

100Run

DNA切刻酶/聚合酶介导的核酸等温扩增

*若您需要这支酶的表达载体和菌株，可以联系我们。

-20℃储存，干冰运输。

包装内容：

产品编号	产品名称	包装
P40041	HDA Enzyme Mix	0.5ml
B40042	10X SDA Reaction Buffer	0.5ml
K1002	dNTP (10mM each)	150µl

产品简介：

依赖于切刻酶以及链置换聚合酶活性，实现核酸等温指数扩增；

扩增产物长度通常<100bp；

配合荧光染料或者探针，可用于实时扩增检测。

使用说明：

室温设置SDA反应体系如下：

Component	30μl reaction	Final Concentration
10X SDA Reaction Buffer	3µl	1X
dNTP (10mM each)	1.2µl	0.4mM
F Bump Primer (1µM)	1.5µl	50nM
R Bump Primer (1µM)	1.5µl	50nM
F SDA Primer (10µM)	1.5µl	500nM
R SDA Primer (10µM)	1.5µl	500nM
DNA template	1µl
SDA Enzyme Mix	5µl
H₂O	13.8µl

吹吸均匀后短暂离心收集于管底，于55ºC孵育15-60分钟。

10X SDA Reaction Buffer
Tris-HCl (pH7.5)	350mM
KCl	1M
MgCl₂	100mM

常见问题及建议

1. 需严格遵循PCR操作规程以避免模板污染。

2. 反应优化参数：

（1） MgSO₄终浓度范围为3-4.5mM；

（2） NaCl终浓度范围为20-50mM；

（3）引物浓度范围为50-200nM；

3. 引物设计参考环介导等温扩增（LAMP, http://primerexplorer.jp/lampv5e/index.html或者https://lamp.neb.com/#!/）。建议使用F3/B3引物作为Bump引物；F2/B2序列作为SDA引物模板靶向区，并在其5’末端加上BstNBI识别位点和4个A碱基的spacer序列。

4. 可配合荧光染料和探针进行实时检测。